ДНК-лигаза Т4 катализирует образование фосфодиэфирных связей между соседними 5'-фосфатными концами и 3'-гидроксильными концами двухцепочечной ДНК или РНК. Фермент не только катализирует соединение между тупыми или липкими концами, но также восстанавливает одноцепочечные разрезы в двухцепочечной ДНК, РНК или гибридах ДНК/РНК